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呼吸系統(tǒng)類(lèi)動(dòng)物模型

煙熏法慢性支氣管炎動(dòng)物模型

對(duì)于由吸煙引的呼吸道損傷,臨床上還沒(méi)有有效的防治方法,探索有關(guān)吸煙導(dǎo)致呼吸系統(tǒng)損害的發(fā)病機(jī)制,進(jìn)行防治方法的評(píng)價(jià)和新藥的研發(fā),很大程度上需要通過(guò)動(dòng)物模型進(jìn)行。

利用熏煙所致的慢性支氣管炎模型,與人類(lèi)發(fā)病過(guò)程有很大的相似性,為早期適時(shí)對(duì)煙霧引起的呼吸道損傷采用干預(yù)和治療提供幫助。

原理

煙熏法構(gòu)建慢性支氣管炎動(dòng)物模型的基本原理是吸煙所致煙霧對(duì)呼吸道的長(zhǎng)期刺激是慢性支氣管炎最重要的病因,紙煙所含的焦油和煙堿可增加副交感神經(jīng)興奮性,使支氣管收縮痙攣,增加氣道阻力;同時(shí),支氣管黏膜腺體增生與肥大,杯狀細(xì)胞增生與鱗狀上皮細(xì)胞化生,黏膜分泌增多與積聚,上皮細(xì)胞纖毛運(yùn)動(dòng)受抑制;黏膜充血、水腫,肺泡吞噬細(xì)胞功能降低,使氣道凈化能力減弱,均易引起感染。吸煙時(shí)間愈長(zhǎng),煙量愈大,患病率也愈高。

材料與儀器

器材:


① 50 mL 注射器;


② 香煙;


③ 1000 mL 下口瓶;


④ 大鼠/小鼠。

步驟

煙熏法慢性支氣管炎動(dòng)物模型的基本過(guò)程可分為如下幾步:
(一)大鼠
A. 煙熏 25 支紙煙、4 h/d、持續(xù) 2~6 周復(fù)制成亞急性慢性支氣管炎模型,最初引起基底細(xì)胞增生,隨后表層上皮漿液細(xì)胞化生及新形成的黏液細(xì)胞增生和由于細(xì)胞肥大使上皮增厚。并有喉和近端氣道黏膜下腺肥大與氣管黏液量增加,近端和末梢氣道上皮及肺泡上皮增殖。
煙熏停止后,氣管、近端氣道和遠(yuǎn)端細(xì)支氣管分泌細(xì)胞數(shù)量可逐漸恢復(fù)到對(duì)照水平。
(二)小鼠
A. 將小鼠至于 1000 ml 下口瓶中,瓶蓋留有直徑 1.5 cm 通氣孔,下口連接一個(gè)三通管,另兩端分別連接 50 mL 注射器及點(diǎn)燃的香煙,用注射器通過(guò)三通管連續(xù)吸注香煙煙霧,每次 400 mL(瓶中煙霧濃度約為 4%)煙熏 30 分鐘。
B. 前 10 天上、下午各煙熏 1 次,后 10 天每天下午煙熏 1 次,連續(xù) 30 次,全程 20 天。


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