動物實驗
急性胰腺炎模型
胰腺炎動物模型的制備方法主要有以下幾種:
1.?;悄懰徕c造模
1)模型建立方法:大鼠于術(shù)前12h禁食,自由飲水,戊巴比妥溶液2mg/100g體質(zhì)量行腹腔內(nèi)麻醉,固定。經(jīng)上腹正中切口入腹,提起十二指腸以小號血管夾分別夾住十二指腸段和肝門部胰膽管。TB針(4.5針頭,1ml注射器)穿刺胰膽管(最好用微泵注射),注射5%C?;悄懰徕c(0.1ml/100g),持續(xù)1min,停留5min,然后拔除針頭,去除血管夾??捎^察大鼠胰腺組織明顯水腫、出血,縫合腹壁各層。
2)模型的特點和功用:此法是急性壞死性胰腺炎(ANP)較成熟的模型。
3)模型建立和使用注意事項:24h的存活率為50%左右
2.蛙皮素造模
1)模型建立方法:大鼠于術(shù)前12h禁食,自由飲水,蛙皮素(25μg/kg)腹腔注射,注射后5h形成水腫性急性胰腺炎(CIP)
2)模型的特點和功用:此法是水腫性急性胰腺炎模型,程度較輕.
3)模型建立和使用注意事項:現(xiàn)在國內(nèi)以研究ANP為主,使用此模型請注意研究內(nèi)容.
3.逆行膽管注射法
結(jié)扎胰膽管,行主胰管套管插管,經(jīng)主胰管注入可激活胰酶的物質(zhì)或胰酶,如脫氧膽酸鈉、自體膽汁等。胰酶注入胰管產(chǎn)生急性胰腺炎,如與PGE2同時灌注則產(chǎn)生急性壞死性胰腺炎。Schmidt等用低量胰管灌注糖脫氧膽酸結(jié)合靜脈注射蛙皮素制成大鼠急性胰腺炎模型,可產(chǎn)生腺胞中度壞死的均勻損傷,適用于對胰腺炎的研究.
4.胰管膽結(jié)扎法
結(jié)扎進入十二指腸處胰膽管或單純結(jié)扎胰管,Lerch等在壺腹部結(jié)扎胰膽管,結(jié)扎后6h出現(xiàn)水腫性胰腺炎,12h后出現(xiàn)出血、壞死、炎性細胞浸潤。該模型的優(yōu)點是簡單且避免了藥物引起非特異性系統(tǒng)影響,與人體膽汁返流性胰腺炎相類似,但有時只產(chǎn)生輕度胰腺炎。Runzi等對此方法進行了改進,把十二指腸的近端10cm離斷后兩端閉合結(jié)扎膽總管,胃與十二指腸吻合,使胰液流入閉袢,隨其內(nèi)壓增加而發(fā)生逆流,形成急性壞死性胰腺炎,術(shù)后4h發(fā)生水腫性胰腺炎,9~12h有出血壞死。另外,還有用胰管結(jié)扎加胰動脈或靜脈阻斷產(chǎn)生急性胰腺炎.
5.飼養(yǎng)法
用無膽堿乙硫氨酸飼養(yǎng)雌性大鼠制成急性胰腺炎模型,而雄性大鼠對藥物刺激不敏感。用無膽堿乙硫氨酸飼養(yǎng)幼鼠,4d后均發(fā)生了胰腺壞死及腹腔脂肪壞死。原理可能是無膽堿乙硫氨酸致胰腺腺泡分泌作用受阻,酶原顆粒和溶酶體在細胞內(nèi)激活.
6.促分泌法
用蛙皮素類似物CCK-PZ靜脈或皮下注射,使胰腺蛋白水解酶分泌大量增加達到能引起胰腺腺泡自溶的水平.
7.離體胰腺炎模型
主要采用孤立體外灌注技術(shù),游離胰腺及十二指腸,行脾動脈、腸系膜動脈、門靜脈和胰管插管;然后取下胰腺,連接能控制溫濕度的氧和灌注循環(huán)器;穩(wěn)定灌注30min后,從動脈灌注游離脂肪酸模擬酒精性胰腺炎;阻塞胰管并靜脈注射蛙皮素產(chǎn)生膽源性胰腺炎;使缺血2 h產(chǎn)生缺血性胰腺炎.