病理實驗
HE染色實驗
一、概念
蘇木素— 伊紅染色法 ( hematoxylin-eosin staining ) ，簡稱HE染色法 ，石蠟切片技術(shù)里常用的染色法之一 。蘇木素染液為堿性 ，主要使細胞核內(nèi)的染色質(zhì)與胞質(zhì)內(nèi)的核酸著紫藍色 ；伊紅為酸性染料 ，主要使細胞質(zhì)和細胞外基質(zhì)中的成分著紅色 。HE染色法是組織學、胚胎學、病理學教學與科研中基本、使用廣泛的技術(shù)方法。
二、原理
易于被堿性或酸性染料著色的性質(zhì)稱為嗜堿性( basophilia )或嗜酸性( acidophilia )；而對堿性染料和酸性染料親和力都比較弱的現(xiàn)象稱為中性。
三、實驗流程
石蠟切片脫蠟至水→蘇木素染色→伊紅染色→脫水封片→鏡檢
四、實驗結(jié)果
細胞核為藍色，細胞質(zhì)為紅色
五、樣本要求及檢測周期
實物 | 數(shù)據(jù)信息 | 實驗周期 | |
客戶提供 | 固體組織 | 組織部位、拍照倍數(shù)及要求 | ≤40樣本，7工作日 |
我們提供 | 剩余物品 | 實驗報告、結(jié)果圖片 | 40-100樣本，15工作日 |
六、注意事項
①做石蠟包埋樣本保存及運輸：常溫置于4%多聚甲醛固定液內(nèi)保存及運輸（需注意固定液的量最好是組織的10倍以上，樣本需完全浸泡于固定液內(nèi)并防止樣本貼壁固定不良，大標本最好使用大的標本瓶/袋運輸，建議在大標本上按取材包埋要求做多條平行切口，以防標本中心固定不透徹。運輸過程中防止固定液滲漏）。
②采用石蠟切片制片，取材后應立即放入固定液中，4度運輸，避免凍存;
采用冰凍切片制片應取新鮮組織，-80℃保存，干冰運輸
七、實驗流程
石蠟切片脫蠟至水→抗原修復→阻斷內(nèi)源性過氧化物酶→血清封閉→孵育一抗→孵育二抗→DAB顯色→復染細胞核→脫水封片→鏡檢
八、注意事項：
做石蠟包埋樣本保存及運輸：常溫置于4%多聚甲醛固定液內(nèi)保存及運輸（需注意固定液的量最好是組織的10倍以上，樣本需完全浸泡于固定液內(nèi)并防止樣本貼壁固定不良，大標本最好使用大的標本瓶/袋運輸，建議在大標本上按取材包埋要求做多條平行切口，以防標本中心固定不透徹。運輸過程中防止固定液滲漏）。